一、儀器名稱、廠牌、型號、購置年限
名稱:流式細胞螢光高速四向分選系統
Fluorescence-Activated Cell Sorting System(FACS)
廠牌:Beckman Coulter
型號:MoFlo™ XDP Cell Sorter System
購置年限:2010/10
二.儀器放置地點
國研大樓12樓貴重儀器室
三、重要規格
1.配備三支固態雷射(488nm、633nm和UVnm)
2.可分析七種螢光波段
488nm laser
FL1: (530/40 nm BP) for FITC, GFP
FL2: (580/30 nm BP) for PE, YFP
FL3: (613/20 nm BP) for PE-TexRed, PI(DNA)
FL4: (670/30 nm BP) for PE-Cy5, 7-ADD(DNA)
UVnm laser
FL5: (457/50 nm BP) for DAPI or Hoechst blue
FL6: (628/32 nm BP) for Hoechst red
633nm laser
FL7: (670/30 nm BP) for APC
3.溫控系統:4至40℃,以提高分選細胞之活性。
4.上樣樣品管規格:1.5, 5, 50 mL管
5.噴嘴大小:70μm
6.分選格式: 6-1538 microplate or 4-way sort(1.5, 5, 15, 50 mL管)
7.分析速度:100,000 events/sec
8.分選速度: 在回收率>90%,分選純度>99%的條件下,可達70,000 events/sec
9.分選模式:
-Enrich mode
-Purity mode
-Single mode
四、服務項目
分選後的細胞能直接用於培養、移植、核酸提取、單細胞PCR擴增或原位雜交等,可進一步進行細胞基因、蛋白質 、功能特性的研究和不同細胞間的差異化研究。高回收率特別適用於幹細胞等極低含量的細胞研究。
在幹細胞研究、免疫學研究和需要將不同特性的族群分離的實驗中,流式細胞分選儀扮演十分重要的角色。其中,需要使用流式細胞分選儀分選樣本大多數為活細胞,以便後續實驗進行培養或操作相關活體動物實驗。因此,分選後的細胞回收率與存活率對於後續實驗是否能順利進行影響甚鉅。
高階流式細胞分選儀的單一細胞分選功能幾乎皆為標準配備,對於挑選穩定的細胞株(stable clone)與觀察單一細胞功能或搭配後端進行單一細胞(Single cell) NGS定序皆有很大的幫助。
五、管理辦法及使用辦法:
1. 須先於一週前與技術員討論代檢時間及內容,當天若欲取消或預約儀器必須通知管理單位,有任何疑問歡迎隨時來電或e-mail討論。
2. 為避免阻塞管路,樣品(及對照組)需先經適當孔徑濾膜過濾去除組織塊或細胞圍塊,並請先行估計樣品大小。分選之樣品濃度建議至少 2x105 cells/ml,可有效率進行分選。
3.除鞘流液之外,需自行準備所需待測樣品與實驗試劑(抗體、螢光染劑等)、對照組及懸浮樣品用緩衝液等。
4.禁止使用同位素及感染性之樣品
5.未經儀器管理人員同意,不得加裝任何零件或更改系統設定及安裝軟體,實驗數據的存取僅限使用全新之 (VCD /DVD) 光碟片,不可以其他任何方式儲存。
6.本機台管理單位視使用情況每年辦一次講習會,進行教育訓練。
7.為維持與提昇服務品質,期刊著作中使用本系統分析者,請於期刊論文之誌謝或方法中提及本儀器名稱與所在單位。
期刊制式感謝詞
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中文:
本論文感謝高雄醫學大學附設中和紀念醫院,臨床醫學研究部,基因體及蛋白質體醫學研究室協助。
英文:
The authors are grateful to Genomics and Proteomics Medical Laboratory, the Department of Medical Research, Kaohsiung Medical University Chung-Ho Memorial Hospital for the technical assistance.
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六、儀器操作預約:
請與管理人員聯絡: 張琬淑技術員 TEL:07-3121101#6350
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